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酶解法.酶解法通过利用几丁质酶、纤维素酶或溶壁酶等酶液的一种或多种,使灵芝抱子细胞壁中的成分降解,释放其有效成分.使用生物酶辅助提取灵芝酸A,终实现灵芝酸A的提取率达到0.54%. 溶菌法.利用微生物和灵芝抱子一同发酵,让微生物在发酵过程中降解灵芝抱子细胞壁.利用益生菌枯草芽抱杆菌、嗜酸乳杆菌与灵芝抱子进行液态发酵,终使得灵芝抱子破壁率达到85%以上.化学法化学法的优点与生物法较为相似;缺点是提取溶剂易导致有效成分变性,且溶剂残留不易去除.溶剂提取法.溶剂提取法利用“相似相溶”原理,使灵芝抱子在水、乙醇等溶剂中长时间浸泡或回流,从而使有效成分扩散到溶剂中.例如,Lee等8采用25%乙醇提取灵芝中的成分,终减压浓缩并定容至500mL保存,通过灵芝的25%乙醇提取物,研究其通过Nrf2/HO-1通路增强细胞的抗氧化作用,该方法对灵芝孢子的提取率较好.
准备工作椴木选伐壳斗科树种较理想,特别是青冈属、栎属种为好,有实践证明供灵芝栽培的树种约77种,一般来说凡是适于香菇、木耳栽培的树种,也能用于灵芝菌椴木栽培。要求树皮厚实、形成层发达,不易与木质部剥离;木材容重比较大,材质较硬实;汉中一般在11月下旬至1月中旬份采伐椴木,树木直径要求6—20cm,直径过大者,可辟材做料,亩备材约25—30to接种时间汉中接种时间一般安排在12月下旬至元月中旬,这段汉中气温低、少雨、空气干燥,感染率低,接种成活率高,为理想。4月初气温稳定在20T以上,可埋菌棒使灵芝原基慢慢生长,经过半月时间发菌,菌丝积累养分多,为子实体正常生长提供了营养供应,年内可收获1—2潮灵芝。菌种准备汉中目前主要品种为赤芝1号,盖大、肉厚、色泽亮,感染率低,产量高,较为理想。亩备种为2000kg。
碾压、挤压法.在低温等条件下,利用罐体和球磨等的迅速摆动、碾磨、挤压将灵芝抱子破壁.利用高能纳米冲击磨对灵芝抱子进行破壁处理,灵芝抱子的破壁率在80%以上,且能有效解决黏球、黏壁现象.高压气爆法.高压气爆法通过在某一时间内将未破壁的灵芝抱子维持在高压力的状态中,然后在另一时间内泄压至较低压力,使灵芝抱子细胞壁上的孔穴增大和增多.例如,刘东波等运用高压气爆法处理灵芝抱子样品后,灵芝多糖和三萜提取率有较大提高. 气流粉碎法.气流粉碎法使压缩空气通过特定角度的研磨嘴进入研磨腔,产生高速的螺旋状气流,物料在螺旋气流的带动下在研磨腔内高速旋转,颗粒间由于不同速度而产生碰撞,从而达到粉碎的效果.例如,肖鑫等利用高压气流粉碎法处理灵芝抱子,破壁率达99%以上.
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超声波法主要利用超声的空机械振动和空化效应来破坏灵芝抱子细胞壁.例如,Alzorqi等利用超声波提取P-D-葡聚糖,在优化条件下p-D-葡聚糖的产量为5.228mg/g.微波法.微波法利用微波的穿透能力和热效应,使细胞内部的温度迅速上升,从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的压力而破碎,促使其有效成分释放.例如,先将灵芝抱子进行微波处理,而后在低温深加工,灵芝抱子的破壁率可达99%以上.超临界提取法.超临界提取法利用气体在超临界状态下的性质,即流体的性质,使有效成分被流体萃取,Li等M运用超临界CO2萃取技术提取灵芝抱子,萃取率达到37%.机械法机械法的优点是操作简单、易行;缺点是机械设备投资大、运行成本较高.
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